Il blocco dei checkpoint immunitari nell’immunoterapia del cancro

Tra gli approcci più promettenti per attivare l’immunità antitumorale terapeutica c’è il blocco dei checkpoint immunitari. I checkpoint immunitari si riferiscono a una pletora di percorsi inibitori cablati nel sistema immunitario che sono cruciali per mantenere l’autotolleranza e modulare la durata e l’ampiezza delle risposte immunitarie fisiologiche nei tessuti periferici al fine di ridurre al minimo il danno tissutale collaterale.

È ora chiaro che i tumori cooptano alcune vie del checkpoint immunitario come uno dei principali meccanismi di resistenza immunitaria, in particolare contro le cellule T che sono specifiche per gli antigeni tumorali. Poiché molti dei checkpoint immunitari sono avviati dalle interazioni ligando-recettore, possono essere prontamente bloccati da anticorpi o modulati da forme ricombinanti di ligandi o recettori. .

Gli anticorpi citotossici dell’antigene 4 associati ai linfociti T (CTLA4) sono stati i primi di questa classe di immunoterapici a ottenere l’approvazione della Food and Drug Administration (FDA) statunitense. I risultati clinici preliminari con i bloccanti di ulteriori proteine del checkpoint immunitario, come la proteina di morte cellulare programmata 1 (PD1), indicano opportunità ampie e diverse per migliorare l’immunità antitumorale con il potenziale di produrre risposte cliniche durature.

Cofattore di ingresso dell’HIV-1: clonazione funzionale del cDNA di un recettore accoppiato a proteine G a sette transmembrana.

Un cofattore per la fusione e l’ingresso dell’HIV-1 (virus dell’immunodeficienza umana di tipo 1) è stato identificato con l’uso di una nuova strategia di clonazione del DNA complementare funzionale (cDNA). Questa proteina, denominata “fusina”, è un presunto recettore accoppiato alla proteina G con sette segmenti transmembrana.

La fusione ricombinante ha consentito ai tipi di cellule non umane che esprimono CD4 di supportare la fusione cellulare mediata da HIV-1 Env e l’infezione da HIV-1. Gli anticorpi contro la fusione hanno bloccato la fusione cellulare e l’infezione con normali cellule bersaglio umane CD4-positive. I livelli di RNA messaggero della fusione erano correlati con la permissività dell’HIV-1 in diversi tipi di cellule umane. Fusin ha agito preferenzialmente per isolati linea-tropici di cellule T, rispetto alla sua attività con isolati macrofagetropici di HIV-1.

Un sistema semplificato per la generazione di adenovirus ricombinanti.

Gli adenovirus ricombinanti forniscono un sistema versatile per studi sull’espressione genica e applicazioni terapeutiche. Riportiamo qui una strategia che semplifica la generazione e la produzione di tali virus. Un plasmide adenovirale ricombinante viene generato con un minimo di manipolazioni enzimatiche, utilizzando la ricombinazione omologa nei batteri piuttosto che nelle cellule eucariotiche.

Dopo le trasfezioni di tali plasmidi in una linea cellulare di confezionamento di mammiferi, la produzione virale viene convenientemente seguita con l’ausilio di una proteina fluorescente verde, codificata da un gene incorporato nella spina dorsale virale. Virus omogenei possono essere ottenuti da questa procedura senza purificazione della placca. Questo sistema dovrebbe accelerare il processo di generazione e test di adenovirus ricombinanti per una varietà di scopi.

Efficacia e sicurezza della proteina C attivata umana ricombinante per sepsi grave

Surviving Sepsi Campaign: linee guida internazionali per la gestione della sepsi grave e dello shock settico: 2008